Thermo Scientific Pierce Crosslink IP試劑盒通過優化甲醛交聯條件(1%甲醛,10分鐘)與可裂解交聯劑設計,將免疫沉淀效率提升至傳統方法的3倍以上。該技術采用雙功能交聯劑DSG與DSS的組合,實現細胞內蛋白復合物的"原位凍結",特別適用于轉錄因子、染色質相關蛋白等弱相互作用研究。本文系統評估其交聯動力學、抗體兼容性及在ChIP-seq中的應用效果。
關鍵詞:
Crosslink IP 甲醛交聯 免疫共沉淀 蛋白互作 染色質研究
智能交聯系統:
可逆交聯:含二硫鍵的交聯劑(DTSSP)可用β-ME還原
距離優化:7.7?交聯臂長精準匹配蛋白相互作用界面
淬滅增強:125mM甘氨酸淬滅效率>99.5%
超聲兼容:交聯后染色質片段化效率保持85%
結合效率:轉錄因子NF-κB的IP回收率≥80%
背景控制:非特異性結合降低至總蛋白的0.1%
抗體節省:抗體用量減少50%(對比傳統IP)
質譜兼容:交聯肽段可直接用于LC-MS/MS分析
3.1 動態互作捕捉
成功捕獲雌激素受體與輔激活子SRC-3的瞬時相互作用(t1/2<2分鐘)
3.2 染色質三維結構
聯合Hi-C技術解析CTCF介導的染色質環結構(分辨率提升至5kb)
結語:
Thermo Fisher Scientific通過這三款創新產品,在蛋白質組學、核酸提取與蛋白互作研究領域樹立了新的技術。其共同特點是將自動化、智能化技術與基礎研究方法深度融合,為生命科學研究提供更精準、高效、可靠的解決方案。隨著多組學整合時代的到來,這些技術平臺將在轉化醫學和精準醫療領域發揮更大價值。